Program Directors
 

Superviseur : Chris Kennedy, PhD
Bourse : Le programme de stages de recherche d’été KRESCENT pour étudiantes et étudiants
Institution : Université d'Ottawa / L'Institut de recherche de l'Hôpital d'Ottawa
Année : 2025
 
Titre de la demande : Rôle de la NOX-5 au niveau du tube proximal en lien avec des lésions rénales dues à l’hypertension induite par l'angiotensine II

Biographie :
Michael est inscrit en quatrième année du programme de baccalauréat spécialisé en médecine moléculaire et translationnelle à l'Université d'Ottawa. Il se passionne pour le service à la communauté, la course de fond et les voyages. Il a précédemment mené des recherches dans le cadre du programme SEA-PHAGES ainsi que dans le laboratoire de régénération neuronale de l’Université d’Ottawa.

Résumé grand public :
Mes travaux portent sur l'enzyme NADPH oxydase 5 (NOX5). La NOX5 est une enzyme transmembranaire qui a été identifiée comme un contributeur important aux formes réactives de l’oxygène (FRO) (ROS ou Reactive Oxidative Species) chez l'être humain, notamment le superoxyde. Des études antérieures ont montré que la NOX5 est induite dans le tubule proximal des personnes souffrant d'hypertension. Il s'agit également d'une enzyme qui réagit à la signalisation de l'angiotensine II. L'expression et l'activation de la NOX5 pourraient donc contribuer aux lésions cellulaires associées à l'inflammation et/ou à la fibrose qui surviennent dans le tissu rénal au fil de l’évolution de la néphropathie hypertensive. Afin de mieux comprendre le fonctionnement de la NOX5, deux hypothèses seront testées.

Selon la première hypothèse, l'expression de la NOX5 transgénique humaine dans le tubule proximal de souris provoque une exacerbation des lésions et une hausse de la pression artérielle. Pour vérifier cette hypothèse, une lignée de souris dont l’expression de la NOX5 est inductible dans le tubule proximal sera soumise à une hypertension induite par l'angiotensine II pendant quatre semaines. Des souris Pax8-rtTA sont croisées avec une lignée de souris transgéniques NOX5 afin de générer des souris NOX5PT. Ces souris sont nourries avec un régime contenant de la doxycycline pendant deux semaines avant l'implantation de pompes osmotiques destinées à administrer de l'angiotensine II. La pression artérielle est mesurée chaque semaine par pléthysmographie au moyen d’un manchon caudal. Des prélèvements sanguins et urinaires ponctuels sont effectués une semaine avant l'installation des pompes et à la fin de l'étude. Le plasma est prélevé pour déterminer la créatinine et l'azote uréique sanguin. L'urine est analysée en vue de mesurer le rapport albumine/créatinine et de quantifier les grandes vésicules extracellulaires (VE). Les reins sont prélevés à la fin de l'étude pour réaliser une étude histologique et immunohistochimique de la NOX5 et pour évaluer les marqueurs de lésions rénales (ARNm/protéine).

Selon la seconde hypothèse, la NOX5 stimule l'expression de gènes pro-inflammatoires et la formation de vésicules extracellulaires (VE) dans les cellules épithéliales du tube proximal chez l’être humain. Pour vérifier cette hypothèse, une lignée de cellules épithéliales du tubule proximal humain est cultivée et traitée avec différentes concentrations d'angiotensine II (0-500 nM) pendant 24 et 48 heures. Le milieu de culture est recueilli pour quantifier les VE et analyser l'ADNmt. Les cellules sont également récoltées pour des études de séquençage de l’ARN à grande échelle. De plus, l'expression de la NOX5 peut être manipulée par inactivation de l’ARNsi ou par transduction adénovirale.
Les réponses à ces questions nous fourniront des informations cruciales sur l'interaction entre la NOX5 et l'angiotensine II.